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酸性磷酸酶染色试剂盒图片
产品货号:
HR8332
中文名称:
酸性磷酸酶染色试剂盒
英文名称:
产品规格:
50T
发货周期:
1~3天
产品价格:
询价
胞质内的酸性磷酸酶在酸性条件下,磷酸萘酚AS-BⅠ被细胞内酸性磷酸酶(acid phosphatase,ACP)水解产生萘酚AS-BⅠ,再与重氮盐偶联,形成不溶性有色沉淀。
本试剂盒适用于细胞涂片、细胞爬片、血涂片、骨髓涂片、冰冻切片及石蜡切片等的染色。阳性反应为鲜红色或深红色颗粒,定位于胞浆当中。

储存条件:2-8℃密封保存。
有效期:三个月。工作液现用现配,一次用完。

注意事项:
1.使用前请仔细阅读说明书。
2.所有的工作液请使用前新鲜配制,配制后立即使用,一次使用完。
3.石蜡切片不需要固定。
4.水洗后不要太干即放入孵育液中孵育,太干后染色效果会变差。
5.用底物孵育液孵育时要注意避光。
6.如果样本为骨片的石蜡切片,不可用酸脱钙法脱钙,酸脱钙对蛋白质酶类的影响较大,使细胞中的特异性酶失活,从而影响特异性的酶染色,导致酶不能跟底物结合,会使染色失败。请使用其他对蛋白质的影响小的脱钙方法。

使用方法:
工作液的配制:
1.底物反应液一配制:使用前用移液器将试剂B吸入试剂A中,溶解混匀,配成甲液;将试剂D吸入试剂C中,溶解混匀,配成乙液。将甲液和乙液混匀即成底物反应液一。
2.底物反应液二配制:使用前用移液器将试剂F吸入试剂E中,溶解混匀,即成底物反应液二。
3.底物孵育液的配制:在染色缸中加入30ml蒸馏水,37℃水浴10分钟。将底物反应液一、二、三依次加入已预温的蒸馏水中混合并充分混匀。
4.将样本玻片固定,水洗后还未完全干前,立即放入已准备好的底物孵育液中避光孵育60分钟。
5.新鲜血涂片、细胞涂片爬片、冰冻切片用固定液固定2-10分钟。石蜡切片脱蜡后不需要再固定。
样本的染色处理:
一、血涂片及骨髓涂片
1.推片:取全血或骨髓3μl左右置载玻片上,将推玻片保持与载玻片30°角,置于血滴正前方,稍微往后移与血滴接触,血滴沿推片下缘散开,再匀速沿载玻片平面平稳向前滑动,至血滴铺完血膜为止。不要太薄,以免细胞太少,也不要太厚,以免太重叠。
2.固定:让涂片在空气中自然晾干,再放入本试剂盒中的固定液中固定2-3分钟,水洗30-60秒。
3.孵育:水洗后还未完全干前放入底物孵育液中避光孵育60分钟。太干后染色效果会变差。
4.复染:孵育完后,取出水洗1分钟,在玻片未完全干前进行复染。可用苏木素复染1-2分钟,或者用甲基绿复染2-3分钟,两者任选其一即可。
二、细胞涂片及细胞爬片
1.固定:将细胞涂片或细胞爬片放入本试剂盒中的固定液中固定2-3分钟,水洗30-60秒。
2.孵育:水洗后还未完全干前放入底物孵育液中避光孵育60分钟。太干后染色效果会变差。
3.复染:孵育完后,取出水洗1分钟,在玻片未完全干前进行复染。可用苏木素复染1-2分钟,或者用甲基绿复染2-3分钟,两者任选其一即可。
三、冰冻切片
1.回温:将保存在-20℃冰箱中的冰冻切片放置到切片架上回温5-10分钟。可以放在37℃孵箱中进行回温,或者将切片架放置在一个小盒子中,将盒子置于37℃水浴锅中进行回温。
2.水合:将回温好的切片,水中浸泡1-2分钟。
3.固定:让切片在空气中自然晾干,再放入本试剂盒中的固定液中固定2-3分钟,水洗30-60秒。
4.孵育:水洗后还未完全干前放入底物孵育液中避光孵育60分钟。太干后染色效果会变差。
5.复染:孵育完后,取出水洗1分钟,在玻片未完全干前进行复染。可用苏木素复染1-2分钟,或者用甲基绿复染2-3分钟,两者任选其一即可。
四、石蜡切片
1.脱蜡:二甲苯中脱蜡5-10分钟。再换用新鲜的二甲苯脱蜡5-10分钟。
2.无水乙醇浸泡5分钟。再分别用90%、70%乙醇各2分钟。
3.水合:蒸馏水中浸泡2分钟。
4.孵育:还未完全干前放入底物孵育液中避光孵育60分钟。太干后染色效果会变差。
5.复染:孵育完后,取出水洗1分钟,在玻片未完全干前进行复染。可用苏木素复染1-2分钟,或者用甲基绿复染2-3分钟,两者任选其一即可。

结果分析:
阳性反应为鲜红色或深红色颗粒,定位于胞浆中。
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